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पानी, मिट्टी और हवा के अध्ययन के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी तरीकों

सूक्ष्म जीवों - छोटे, ज्यादातर एक कोशिकीय जीव है, जो प्रकृति में बड़े पैमाने पर कर रहे हैं। वे मनुष्यों और पशुओं में सभी मीडिया (हवा, मिट्टी, पानी) में पाए जाते हैं पौधों में।

गुणात्मक विविधता और जीवों की संख्या मुख्य रूप से पोषण यौगिकों पर निर्भर हैं। लेकिन यह भी आर्द्रता, तापमान, वातन और सूरज की रोशनी और अन्य कारकों की कार्रवाई के रूप में महत्वपूर्ण है।

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. स्वच्छता एवं सूक्ष्म अध्ययन के प्राकृतिक मीडिया के लिए तरीके रोगाणुओं की उपस्थिति का पता लगाने कर सकते हैं और प्राप्त परिणामों के अनुसार उनकी मात्रा निर्धारित करने के, हटाने या संक्रामक रोगों को रोकने के लिए उपायों को विकसित करने के लिए। इसके अलावा, मात्रात्मक खाता पारिस्थितिकी तंत्र मॉडलिंग और शासन की प्राकृतिक प्रक्रिया के विकास के लिए आवश्यक है। . हमें आगे विचार क्या सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के तरीके हैं करते हैं।

धरती

यह संक्रामक विकृतियों के संचरण के संभावित मार्गों में से एक के रूप में विद्वानों द्वारा माना जाता है। मिट्टी मर्मज्ञ रोगाणुओं में स्राव मानव या पशु रोगी के साथ। उनमें से कुछ, विशेष रूप से, बीजाणु में, एक लंबे समय (कभी कभी दशकों के लिए) के लिए मिट्टी में बच सकते हैं। позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). मिट्टी के सेनेटरी-सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के तरीके ऐसे टिटनेस, एंथ्रेक्स, बोटुलिज़्म, और इसके आगे के रूप में मिट्टी गिरावट रोगजनकों इस तरह के खतरनाक संक्रमण। आप "माइक्रोबियल गिनती" (एक ग्राम का मिट्टी में सूक्ष्मजीवों की संख्या), और कोलाई सूचकांक (ई कोलाई की संख्या) निर्धारित करने की अनुमति ।

मिट्टी विश्लेषण: एक सिंहावलोकन

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. मिट्टी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के लिए तरीके मुख्य रूप से ठोस पर प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी और संस्कृति के लिए जिम्मेदार ठहराया जाना चाहिए पोषक मध्यम। सूक्ष्मजीवों और उनके समूहों है कि मिट्टी में निवास, की आबादी वर्गीकरण की स्थिति और पारिस्थितिक कार्यों पर भिन्न होते हैं। विज्ञान में, वे सामान्य शब्द के तहत एकजुट हो रहे हैं "मिट्टी बायोटा।" प्राइमर - सूक्ष्मजीवों के निवास स्थान के बड़ी संख्या। मिट्टी के ग्राम में 1 से 10 उनकी कोशिकाओं की अरब से मौजूद है। इस वातावरण में, सक्रिय रूप से विभिन्न मृतोपजीवी सूक्ष्मजीवों की भागीदारी के साथ, कार्बनिक पदार्थ के अपघटन लेता है।

सूक्ष्मजीवविज्ञानी विधि का सूक्ष्म अध्ययन: चरणों

मध्यम के विश्लेषण से नमूने के साथ शुरू होता है। इस प्रयोजन के लिए पहले से खुली है और कसा हुआ शराब चाकू (फावड़ा इस्तेमाल किया जा सकता है)। उसके बाद, नमूना तैयारी। अगले कदम - कोशिकाओं दाग स्मीयरों गिनती। प्रत्येक चरण के लिए अलग से विचार करें।

सैम्पलिंग

कृषि मिट्टी के विश्लेषण में पूरी परत की गहराई से लिया नमूना करते हैं। सबसे पहले, जमीन के ऊपर 2-3 सेमी हटा दिया है क्योंकि यह एक बाहरी माइक्रोफ्लोरा में मौजूद हो सकता है। इसके बाद, जमीन के एक क्षेत्र के साथ अध्ययन किया monoliths ले। उनमें से प्रत्येक की लंबाई परत जिसमें से आप नमूने के लिए चाहते हैं की मोटाई का पालन करना चाहिए।

100-200 वर्ग मीटर के भूखंड पर। 7-10 मीटर चयनित नमूने हैं। प्रत्येक का वजन - 0.5 किलोग्राम के आदेश की। नमूने बैग में अच्छी तरह से मिश्रित किया जाना चाहिए। फिर औसत नमूना लगभग 1 किलो वजन ले। यह चर्मपत्र (बाँझ) एक कपड़े की थैली में संलग्न पैकेज में रखा जाना चाहिए। नमूना रेफ्रिजरेटर में संग्रहीत के विश्लेषण निर्देशित करने के लिए पहले।

सर्वेक्षण तैयारी

हड़कंप मच गया मिट्टी सूखी कांच पर डाल दिया। शराब के साथ अपने पूर्व-पोंछ और बर्नर ऊपर जला। एक लेपनी मिट्टी के साथ अच्छी तरह से मिश्रित और समान रूप से विस्तार किया। यह जड़ों और अन्य विदेशी तत्वों को दूर करने के लिए अनिवार्य है। ऐसा करने के लिए, चिमटी का उपयोग करें। इससे पहले कि आपरेशन चिमटी और लेपनी बर्नर ऊपर प्रज्वलित और शांत करने के लिए अनुमति दी।

कांच पर वितरित विभिन्न मिट्टी भूखंडों में से छोटे हिस्से का चयन किया। वे एक तकनीकी स्तर पर एक चीनी मिट्टी के बरतन डिश में तौला। является специальная обработка образца. सूक्ष्मजीवविज्ञानी पढ़ाई की अनिवार्य कदम सूक्ष्म विधि नमूने के विशेष प्रसंस्करण है। 2 अग्रिम, बाँझ फ्लास्क में तैयार रहना चाहिए। इनका आकार 250 मिलीलीटर अधिक नहीं होनी चाहिए। बोतल में से एक नल के पानी की 100 मिलीलीटर में डाल दिया है। यह मिट्टी के 0.4-0.8 मिलीलीटर तरल नमूना लेता है और एक पेस्ट करने के लिए सिक्त क्योंकि। मिश्रण 5 मिनट के लिए एक उंगली या रबर मूसल के साथ मला जाना चाहिए।

पहले कुप्पी से जल मिट्टी जन खाली फ्लास्क में स्थानांतरित कर दिया गया। इसके अलावा, उसे वापस संपर्क में आए। इस बड़े पैमाने पर बर्नर लौ के पास एक फ्लास्क को हस्तांतरित हो जाने के बाद। मिट्टी निलंबन के साथ कंटेनर 5 मिनट के लिए एक शेकर पर हिल गया था। इसके बाद, इसके बारे में 30 सेकंड के लिए व्यवस्थित करने के लिए अनुमति दी गई थी। इस क्रम में बड़े कणों व्यवस्थित करने के लिए अनुमति देने के लिए आवश्यक है। बाद आधे से एक मिनट बड़े पैमाने पर तैयारी की तैयारी के लिए प्रयोग किया जाता है।

तय स्मीयरों पर सेल की गिनती

, разработанному Виноградским. मिट्टी के प्रत्यक्ष सूक्ष्म अध्ययन सूक्ष्मजीवविज्ञानी पढ़ाई की विधि विकसित की Vinogradskii द्वारा किया जाता है। निलंबन की निश्चित मात्रा में सूक्ष्म जीवाणुओं की कोशिकाओं की संख्या में गिना गया था। तय स्मीयरों अध्ययन लंबे समय में दवाओं की दुकान और किसी भी समय गणना प्रदर्शन कर सकते हैं।

दवा की तैयारी के रूप में इस प्रकार है। घोल (आमतौर पर 0.02-0.05 एमएल) की एक निश्चित राशि के स्लाइड पर एक micropipette के साथ लागू किया जाता है। करने के लिए इस समाधान अगर-अगर की एक बूंद जोड़ा गया है (मिश्रण agaropectin polysaccharide और agarose भूरा और लाल शैवाल काला सागर से निकाले), तेजी से हड़कंप मच गया और एक क्षेत्र में 4-6 वर्ग में फैल गया। सेमी। पैप एयर सूखे और 20-30 मिनट के लिए तय की। शराब (96%)। इसके बाद, दवा आसुत जल से सिक्त और पी-पी कार्बोलिक Erythrosine 20-30 मिनट में रखा।

धुंधला के बाद, यह धोया और हवा में सुखाया जाता है। सेल की गिनती विसर्जन लेंस से प्रदर्शन किया।

ठोस मीडिया पर बुआई

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के लिए सूक्ष्म तरीकों सूक्ष्मजीवों की एक बड़ी संख्या का पता लगा सकते। लेकिन बावजूद इस, की विधि टीका व्यवहार में सबसे आम है। इसका सार एक ठोस माध्यम पर एक पेट्री डिश में दवा (मिट्टी निलंबन) की मात्रा बोने में होते हैं।

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान का यह तरीका खाते में न केवल मात्रा लेकिन यह भी समूह, और कुछ मामलों में, और सूक्ष्म वनस्पति की जाति की संरचना लेता है। , उत्पादन कालोनियों की संख्या की गणना आमतौर पर प्रेषित प्रकाश में पेट्री डिश के नीचे से। गणना क्षेत्र पर एक मार्कर या स्याही डॉट रखा।

पानी विश्लेषण

पानी शरीर के माइक्रोफ्लोरा, एक नियम के रूप में, यह चारों ओर मिट्टी के सूक्ष्म संरचना को दर्शाता है। имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. इस संदर्भ में, पानी और मिट्टी के सेनेटरी-सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण के तरीकों के लिए एक विशेष पारिस्थितिकी तंत्र के राज्य के अध्ययन में विशेष रूप से व्यावहारिक महत्व है। ताजा पानी एक नियम, COCCI, छड़ के आकार का जीवाणु के रूप में, शामिल हैं।

पानी में anaerobes कम मात्रा में पाया जाता है। एक नियम के रूप में, वे पानी के शव के निचले भाग में गुणा, कीचड़ में, शुद्धि की प्रक्रिया में भाग लेने। माइक्रोफ्लोरा महासागरों और समुद्र फ़ायदेमंद halophytic (हलोपलिक) बैक्टीरिया का प्रतिनिधित्व किया।

पानी में, उत्स्रुत कूप व्यावहारिक रूप से कोई सूक्ष्मजीवों कर रहे हैं। यह मिट्टी की परत की छानने की क्षमता के कारण है।

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. सूक्ष्मजीवविज्ञानी पानी अनुसंधान के पारंपरिक तरीकों माइक्रोबियल और कोलाई-अनुमापांक या यदि सूचकांक की परिभाषा पर विचार किया। पहले सूचक 1 मिलीलीटर तरल में जीवाणुओं की संख्या को परिभाषित करता है। कोलाई सूचकांक पानी की एक लीटर में मौजूद coliforms की संख्या का प्रतिनिधित्व करता है, और अगर अनुमापांक - न्यूनतम संख्या या अधिकतम कमजोर पड़ने तरल, जिसमें वे अभी भी पता लगाया जा सकता।

माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण

पानी का यह तरीका स्वच्छता सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा इस प्रकार है। पानी की 1 मिलीलीटर में मेसोफिलिक और ऐच्छिक anaerobes (मध्यवर्ती) की संख्या निर्धारित किया जाता है 37 डिग्री पर मांस-peptone अगर (प्राथमिक माध्यम) पर करने में सक्षम aerobes। दिन के दौरान 2-5 पी के एक आवर्धन पर दिखाई कालोनियों के रूप में। या नग्न आंखों।

является посев. पानी की सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण की विधि की महत्वपूर्ण कदम बोई जाती है। क्योंकि प्रत्येक नमूने में कम से कम 2 अलग संस्करणों बोई जाती है। प्रत्येक कप में नल का पानी विश्लेषण शुद्ध तरल के 1-0.1 मिलीलीटर से बना है और 0.01-.001 मिलीलीटर दूषित हो जाता है। 0.1 मिलीलीटर या तरल पदार्थ के छोटे मात्रा का टीका के लिए आसुत (बाँझ) पानी से पतला है। लगातार दशमलव dilutions तैयार करते हैं। इनमें से प्रत्येक के 1 मिलीलीटर दो पेट्री डिश में किया जाता है।

पोषक तत्व अगर से भर ब्रीडिंग। यह पहली बार पिघल चाहिए, और 45 डिग्री करने के लिए शांत। सरगर्मी के बाद, सक्रिय माध्यम solidification के लिए एक क्षैतिज सतह पर छोड़ दिया है। 37 डिग्री पर। फसलों को पूरे दिन में उगाए जाते हैं। позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. सूक्ष्मजीवविज्ञानी पानी अनुसंधान के विचार विधि खाते में उन व्यंजनों का परिणाम लेता है जहां 30 से 300 की रेंज में कालोनियों की संख्या।

हवा

यह सूक्ष्मजीवों के लिए एक पारगमन जमीन माना जाता है। являются седиментация (оседание) и аспирация. सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के मुख्य तरीके हवा अवसादन (निपटाने) और आकांक्षा है।

माइक्रोफ्लोरा हवा वातावरण मनमाने ढंग से चर और निरंतर में बांटा गया है। पहले समूह खमीर, वर्णजनक COCCI, बीजाणु उठाने वाले दण्डाणु कोलाई और अन्य सूक्ष्मजीवों कि सुखाने, प्रकाश के संपर्क करने के लिए प्रतिरोधी रहे हैं शामिल हैं। प्रतिनिधियों चर माइक्रोफ्लोरा, अपने सामान्य निवास स्थान से हवा में मर्मज्ञ, लंबे समय से उनके जीवन शक्ति बरकरार रहती है।

बड़े शहरों में हवा में ग्रामीण क्षेत्रों की हवा वातावरण में अधिक से अधिक सूक्ष्मजीवों। समुद्र में, जंगलों बहुत कुछ बैक्टीरिया होते हैं। एयर शुद्धि की सुविधा वर्षा: हिमपात और वर्षा। घर के अंदर रोगाणुओं खुली जगह में अधिक से अधिक। उनकी संख्या नियमित रूप से वेंटिलेशन के अभाव में सर्दियों में बढ़ जाती है।

अवसादन

считается простейшим. सूक्ष्म जीव विज्ञान में सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान का यह तरीका सबसे आसान माना जाता है। यह गुरुत्वाकर्षण के तहत एक खुला पेट्री डिश में अगर सतह पर बूंदों और कणों के निपटाने पर आधारित है। अवसादन विधि सही ढंग से हवा में बैक्टीरिया की संख्या निर्धारित नहीं कर सकता है। तथ्य यह है कि एक खुला कप में धूल के कणों और बैक्टीरिया काफी मुश्किल की बूंदों के ठीक अंश को पकड़ने के लिए है। सतह पर मुख्य रूप से बड़े कणों को बनाए रखा।

इस विधि हवा के विश्लेषण के लिए इस्तेमाल नहीं किया है। यह वातावरण हवा के प्रवाह की गति में बड़े उतार-चढ़ाव की विशेषता। अवसादन, तथापि, और अधिक परिष्कृत उपकरणों या विद्युत शक्ति स्रोत के अभाव में इस्तेमाल किया जा सकता है।

Omelyansky विधि द्वारा किया जाता माइक्रोबियल की संख्या का निर्धारण। अनुसार उससे में, 100 वर्ग अगर के सतह क्षेत्र पर 5 मिनट के लिए। सेमी सुलझेगी बैक्टीरिया के एक नंबर हवा का 10 लीटर में मौजूद है।

आदेश 535 "जांच के सूक्ष्मजीवविज्ञानी तरीकों के एकीकरण पर"

जीवाणु विश्लेषण निदान, रोकथाम और विभिन्न संक्रामक रोगों के उपचार के उद्देश्य से जटिल नैदानिक और प्रयोगशाला गतिविधियों में एक महत्वपूर्ण स्थान है। हालांकि, पर्यावरण के अध्ययन, वे सीमित नहीं हैं।

विशेष महत्व के अस्पतालों में जैविक सामग्री का जीवाणु विश्लेषण है। स्वास्थ्य सुविधाओं में किए गए शोध के लिए, आवश्यकताओं में वृद्धि हुई। आदेश "जांच के सूक्ष्मजीवविज्ञानी तरीकों के एकीकरण पर" के उद्देश्य के जीवाणु विश्लेषण में सुधार करने, गुणवत्ता और सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान की दक्षता में सुधार है।

महिलाओं में स्मीयरों का सूक्ष्म परीक्षण

यह संक्रमण, यौन संचरित संक्रमणों और अवसरवादी संक्रमण (अवसरवादी बैक्टीरिया) के निदान के लिए विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण तरीका है।

सूक्ष्म विश्लेषण, माइक्रोफ्लोरा के गुणात्मक और मात्रात्मक रचना का मूल्यांकन नमूना की शुद्धता की जांच करने के लिए। उदाहरण के लिए, गर्भाशय ग्रीवा नहर से लिया फाहे में योनि उपकला की उपस्थिति एक जैविक नमूने के चयन के नियमों का उल्लंघन इंगित करता है।

कहा जाता है कि इस मामले में सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा आम तौर पर कुछ समस्याएं द्वारा पीछा किया। वे तथ्य यह है कि कम जननांग पथ में सामान्य रूप से एक विविध माइक्रोफ्लोरा कि अलग अलग उम्र में भिन्न होता है पेश है से संबंधित हैं। अनुसंधान की दक्षता में सुधार करने के लिए और मानकीकृत नियम विकसित किया है।

वायरल संक्रमण का निदान

यह आरएनए और डीएनए रोगाणुओं का पता लगाने के तरीकों से किया जाता है। वे मुख्य रूप से रोग सामग्री में न्यूक्लियोटाइड दृश्यों के निर्धारण पर आधारित हैं। इस प्रयोजन के लिए आणविक जांच। वे कृत्रिम रूप से (के लिए पूरक) वायरल एसिड एक रेडियोधर्मी लेबल या बायोटिन के साथ लेबल के लिए पूरक न्यूक्लिक एसिड का उत्पादन कर रहे हैं।

विधि का विशेष लक्षण के कुछ ही सैकड़ों युक्त विशिष्ट डीएनए टुकड़ा को कॉपी दोहराया है (या के दसियों) जोड़े न्यूक्लियोटाइड। प्रतिकृति (नकल) कि विस्तार केवल कुछ इकाइयों में शुरू हो सकता है है। प्राइमरों (प्राइमरों) उन्हें बनाने के लिए इस्तेमाल किया। वे संश्लेषित ओलईगोन्युक्लियोटाईड्स हैं।

पीसीआर निदान (पोलीमरेज़ चेन प्रतिक्रिया) निष्पादन में सरल है। इस विधि आप जल्दी से रोग सामग्री की एक छोटी राशि का उपयोग करके परिणाम प्राप्त करने के लिए अनुमति देता है। पीसीआर निदान का उपयोग करते हुए तीव्र, पुरानी और अव्यक्त (छुपा) संक्रमण को पहचानती है।

इस विधि की संवेदनशीलता को अधिक बेहतर माना जाता है। हालांकि, मौजूदा परीक्षण प्रणाली नहीं विश्वसनीय पर्याप्त है, तो पीसीआर निदान पूरी तरह से पारंपरिक तरीकों नहीं की जगह ले सकता है।

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