आण्विक निदान: वास्तविक समय पीसीआर

वर्तमान में, आणविक निदान तंत्र तैयार किया गया पोलीमरेज़ चेन प्रतिक्रिया (पीसीआर) है, जो की एक बड़ी संख्या के विकास के लिए प्रोत्साहन था निदान के तरीकों रोगों के, आनुवंशिक सामग्री के निर्धारण के आधार पर। बाहर वास्तविक समय पीसीआर का उपयोग कर जीन टुकड़ा (विशेष रूप से ले जाने के लिए न्यूक्लिक एसिड) प्रेरणा का एजेंट है, जो अन्य व्यक्तियों में नहीं मिला है।

पीसीआर के सिद्धांत एक विशेष इकाई, थर्मल साइक्लर, जो किसी दिए गए कार्यक्रम के लिए तापमान शासन के एक चक्रीय पुनरावृत्ति प्रदान करता है के रूप में भेजा में डीएनए पोलीमरेज़ द्वारा समय की एक निश्चित रोगज़नक़ डीएनए टुकड़ा लाखों लोगों के गुणन है।

निदान पीसीआर amplifications की एक श्रृंखला को दोहराने के लिए, एंजाइम गतिविधि को बनाए रखने की अनुमति देता है। एक सौ दस - प्रवर्धन जगह आसानी से एक चक्र में तीस चक्र के बाद रोगज़नक़ युगल, के डीएनए का एक विशेष खंड के प्रतियों की संख्या लेता है, जब। यही कारण है कि पीसीआर निदान में प्रयोग किया जाता है, इतने छोटे रोगाणुओं, पहचान, जिनमें से यह बिना असंभव है निर्धारित करने के लिए है।

ऐसा लगता है कि शाही सेना वास्तविक समय में पीसीआर के लिए एक टेम्पलेट नहीं हो सकता। इसलिए, प्रवर्धन से पहले विषाणु आरएनए का पता लगाने के लिए डीएनए यह की इसी टुकड़ा के साथ सहसंबद्ध करने के लिए। पोलीमरेज़ चेन प्रतिक्रिया डीएनए और आरएनए माप रोगज़नक़ का उत्पादन करने की अनुमति देता है। जानकारी इस प्रकार प्राप्त इस्तेमाल किया चिकित्सा की प्रभाविता, और नैदानिक रोग का निदान के मूल्यांकन की निगरानी के लिए प्रयोग किया जाता है।

इसके अलावा, वास्तविक समय पीसीआर लक्ष्य डीएनए या amplicons है, जो सही निदान के लिए एक बाधा के रूप में सेवा की डिक्रिप्शन के संबंध में अतिरिक्त कार्रवाई की आवश्यकता होती है और झूठे परिणाम के लिए नेतृत्व नहीं करता है। यह दृष्टिकोण यह संभव वैद्युतकणसंचलन कदम है, जो पोलीमरेज़ चेन प्रतिक्रिया का खतरा कम करने के उत्पादों की ओर जाता है का उपयोग नहीं करता है। इसके अलावा, एजेंट के साथ जोड़तोड़ की संख्या में कमी की वजह से, सर्वेक्षण के समय को कम कर देता है, यह प्रक्रिया को सरल, त्रुटियों की संभावना कम कर देता है। पीसीआर भी आप तीव्रता के समय की पहचान करने और रोगी का इलाज करने के समय पर उपाय करने के लिए मदद करने के लिए एक चिकित्सीय परीक्षण में रोगज़नक़ के डीएनए की प्रतियों की प्रारंभिक संख्या निर्दिष्ट करने की अनुमति देता है।

आज, वास्तविक समय में निर्धारण के प्रवर्धन विधियों में से एक बड़ी संख्या में हैं। सबसे अधिक इस्तेमाल किया विभिन्न तकनीकों amplicon fluorogenic जांच, विकिरण तीव्रता जिनमें से amplicon के संचय के आधार पर और एक विशेष उपकरण एक ऑप्टिकल मॉड्यूल के साथ एक thermocycler कहा जाता है के माध्यम से वास्तविक समय में दर्ज की गई अलग-अलग होता के साथ सहसंबद्ध लागू। यह विश्लेषण की संवेदनशीलता का एक उच्च स्तरीय प्रदान करता है। एक ही पीसीआर उत्पाद पर एक समय में, पता लगाया जा सकता द्वारा उत्पादों की एक बड़ी मात्रा के साथ साथ, का उपयोग करते समय कुछ मामलों में वैद्युतकणसंचलन इसे देखा नहीं है।

द्वारा पीसीआर वास्तविक समय में सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण नमूने का उपयोग। इस प्रकार, एक अध्ययन में सकारात्मक और नकारात्मक नमूने अलग नमूने, एक नियंत्रण नमूना जिसमें ऐसे प्रत्येक नमूने में शुरू की है और सभी विश्लेषण चरणों से गुजरता है के रूप में विश्लेषण किया गया।

आज, बाहर ले जाने के लिए उपकरणों की एक बड़ी संख्या में हैं पोलीमरेज़ चेन प्रतिक्रिया। इन जैव रेड, एप्लाइड Biosystems, Cepheid और रॉश शामिल हैं। उनमें से प्रत्येक फायदे और नुकसान

यह ध्यान देने योग्य है कि पीसीआर -, बड़े पैमाने पर वैज्ञानिक, अनुसंधान और दुनिया भर में नैदानिक केन्द्रों में प्रयोग किया जाता निदान की विधि है क्योंकि यह परिणाम के तत्काल व्याख्या बाहर ले जाने का अवसर देता है।